總大腸菌群 | 濾膜法與紙片快速法

總大腸菌群是作為糞便污染指標(biāo)菌提出來的，主要是以該菌群的檢出情況來表示水中是否有糞便污染。總大腸菌群數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映了對人體健康危害性的大小。糞便是人類腸道排泄物，糞便內(nèi)除一般正常細(xì)菌外，也會有一些腸道致病菌存在（如沙門氏菌、志賀氏菌等），因而水中有糞便污染，則可以推測該水存在著腸道致病菌污染的可能性，必須看作對人體健康具有潛在的危險(xiǎn)性。

目前，用于檢測大腸菌群的方法有多管發(fā)酵法、濾膜法、紙片快速法、酶底物法等。但是小編發(fā)現(xiàn)在行業(yè)存在將濾膜法和紙片快速法弄混的現(xiàn)象，認(rèn)為紙片法是不用抽濾的濾膜法，其實(shí)這是兩個完全不同的檢測方法，今天我們來了解一下這兩個方法的基本原理、操作步驟及優(yōu)缺點(diǎn)等。

用孔徑為 0.45 μm 的微孔濾膜過濾水樣后,將濾膜貼在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，能形成典型菌落經(jīng)革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn)，來檢測水中總大腸菌群的方法。

圖 2 濾膜法操作步驟

紙片快速法

按最大可能數(shù)（MPN）法，將一定量的水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑（溴甲酚紫和2，3，5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及乳糖等營養(yǎng)成分的無菌濾紙上，在特定的溫度（37℃）培養(yǎng)18-24h，當(dāng)細(xì)菌生長繁殖時(shí)，產(chǎn)酸使pH值降低，溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色，同時(shí)，產(chǎn)氣過程相應(yīng)的脫氫酶在適宜的pH范圍內(nèi)，催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(diǎn)（或紅暈）。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷，從而確定是否有總大腸菌群存在，再通過查MPN表就可得出相應(yīng)總大腸菌群的濃度值。